链霉亲和素(Streptavidin)是一种从链霉菌(Streptomyces avidinii)中提取的蛋白质,因其与生物素(Biotin)的超高亲和力结合而被广泛应用于生物技术领域。链霉亲和素凭借其超高亲和力、低背景、多功能性,成为生物素相关技术的“黄金标准”,尤其在需要高灵敏度或复杂体系(如单分子检测、活体成像)的研究中不可或缺。
将Hela细胞与抗微管蛋白的鼠抗体以及生物素标记的抗鼠 IgG 的山羊抗体一起孵育,随后加入得克萨斯红®-链霉亲和素偶联物(红色)。细胞核用 Hoechst 33342 染色(蓝色,货号 17530)。
一、主要作用
1.生物素结合与信号放大
链霉亲和素能特异性结合生物素,形成几乎不可逆的复合物
应用场景:
检测技术:ELISA、Western blot、免疫荧光中,通过生物素标记的抗体与链霉亲和素偶联的酶/荧光染料结合,放大检测信号。
2. 分子固定
将生物素标记的DNA、蛋白质固定在链霉亲和素包被的载体(如磁珠、芯片)上。
3.亲和纯化
通过生物素-链霉亲和素系统纯化目标分子(如生物素标记的蛋白质、核酸),例如在Pull-down实验或CRISPR基因编辑中捕获特定DNA片段。
4.纳米技术与诊断
用于构建生物传感器、纳米材料自组装,或诊断试剂盒中作为信号放大模块(如化学发光检测)。
二、核心优势
1.超高亲和力
生物素结合力强于抗体-抗原相互作用,确保实验的稳定性和灵敏度。
2.低非特异性结合
链霉亲和素为中性蛋白(不带强电荷),而亲和素(Avidin)因带正电荷易与细胞膜等负电物质结合,导致高背景。链霉亲和素的低背景特性使其更适合高精度实验。
3.稳定性强
耐高温(70–80°C)、抗变性剂(如SDS、尿素),可在苛刻条件下使用。
4.四价结合能力
四聚体结构允许同时结合4个生物素分子,增强信号放大(如多酶复合物标记)。
5.低免疫原性与毒性
链霉亲和素无糖基化,而亲和素(来自蛋清)可能引发免疫反应,因此链霉亲和素更适合体内实验或临床诊断。
6.灵活的功能化
易与荧光染料、酶(HRP、AP)、磁珠等偶联,形成多功能工具复合物。
三.储存方式
储存条件:收到后,将冻干粉末储存在<-15℃,并避免光照和潮湿。 准备使用时,将含有0.1%牛血清白蛋白的ddH2O加入小瓶中,得到1mg / mL储备液。当在2mM叠氮化钠存在下储存并且在4℃下避光时,该重构溶液保持稳定两个月而没有显著变化。对于更长时间的储存,重构溶液可以分成单次使用的等分试样,或者加入等体积的溶液。不等分的甘油(终浓度为50%),并将溶液储存在-20℃(避光)。该产品在-20℃下稳定1年。
注:对于所有RPE,APC和PerCP重建的缀合物将它们储存在2-6℃(不要冷冻)。