在蛋白质这类复杂生物大分子中，N端（氨基末端）和C末端（羧基末端）并非只是结构上的“起点与终点”，它们分别承担着识别、定位、调控与降解等核心功能。随着蛋白质组学和生物制药领域的迅速发展，N端和C末端的氨基酸序列分析不仅成为理解蛋白质功能的切入点，也为疾病机制研究和生物药开发提供了关键支持。

一、为什么关注蛋白质的N端和C末端？

蛋白质合成从N端开始、以C端结束，两个末端共同参与了蛋白质生命周期的多个关键环节：

1、N端决定去向与命运

信号肽、多肽加工、N端规则（N-end rule）等调控机制都依赖于N端氨基酸的组成和修饰状态。

2、C端定义稳定性与功能界面

许多蛋白质的活性中心、修饰位点或相互作用结构位于C端，且C端易受变异剪切的影响，是功能多样性的来源。

因此，系统性地对这两端进行氨基酸序列解析，有助于揭示蛋白质的合成路径、功能特性和潜在的生物学角色。

二、N端氨基酸序列分析

1、技术路径

（1）Edman降解：传统的化学测序方法，逐步识别N端氨基酸，适用于纯化蛋白及短肽。

（2）质谱法（LC-MS/MS）：通过酶解后识别含N端的肽段，结合化学标记（如丹磺酰氯）可提高灵敏度。

（3）自上而下（Top-down）质谱：无需酶解，直接分析蛋白整体，适用于结构复杂、修饰多样的蛋白。

2、应用亮点

（1）蛋白信号肽识别、翻译起始位点验证

（2）N端修饰（乙酰化、甲酰化）识别与功能研究

（3）重组蛋白和抗体药物的质量控制

三、C末端氨基酸序列分析

1、技术路径

（1）羧肽酶法：逐步释放C端残基，适合于特定研究用途。

（2）酶解+LC-MS/MS：结合特异性酶解策略（如胰酶+羧肽酶Y）和高分辨质谱进行C端序列推断。

（3）化学标记法：使用EDC等试剂选择性标记C端羧基，结合磁珠富集目标肽段。

2、应用亮点

（1）蛋白质降解路径追踪（如E3泛素连接酶识别的C末信号）

（2）疾病剪切变体检测（如癌症中的C端截短蛋白）

（3）多肽药物设计与修饰位点评估

四、N端与C端联合分析的价值

在精准蛋白质组学研究中，N端与C端序列分析具有互补价值：

• 构建全长蛋白质序列图谱，尤其适用于未知蛋白或翻译后剪切变体。
• 解析蛋白质加工与降解过程，揭示信号通路的动态变化。
• 生物标志物开发，识别特异性剪切片段用于疾病早期检测。

五、总结

N端和C末端氨基酸序列分析，正逐步从“技术手段”转变为“功能解码”的核心工具。随着高分辨质谱、化学探针和AI算法的发展，这一领域将进一步迈向高通量、高精准、广覆盖的新阶段。百泰派克生物科技提供包括Edman降解、LC-MS/MS、化学标记等多种N/C端测序方案，助力您的蛋白质研究更进一步。如果您在蛋白质结构确认、翻译后修饰研究或药物研发中遇到技术瓶颈，欢迎随时与我们联系！

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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